色譜柱各個參數(shù)的含義
1.柱長:一般以毫米(mm)為單位,常見的有 100mm、150mm、250mm 等。柱長主要影響分離度和分析時間,柱長越長,分離效果通常越好,但分析時間也會相應(yīng)延長,同時柱壓也會增加。
2.內(nèi)徑:通常在 0.1mm-5mm 之間,如 0.25mm、4.6mm、10mm 等。內(nèi)徑大小決定了樣品的負載量和流動相的流速。內(nèi)徑越大,樣品負載量越高,需要的流動相流量也越大,但柱效可能會有所降低;內(nèi)徑越小,柱效越高,所需流動相流量越小,但對儀器的要求更高,且樣品負載量較低。
3.固定相種類:不同的固定相具有不同的化學性質(zhì)和分離特性,決定了色譜柱的適用范圍和分離機制。常見的有反相 C18 柱,其固定相是十八烷基硅烷鍵合硅膠,適用于分離非極性和中等極性的化合物;正相硅膠柱,以硅膠為固定相,常用于分離極性化合物;離子交換柱,固定相帶有離子交換基團,用于分離離子型化合物等。
4.粒徑:指固定相顆粒的大小,通常用微米(μm)表示,常見的有 3μm、5μm、10μm 等。粒徑越小,柱效越高,分離效果越好,但柱壓也越高,對儀器的要求也更高,同時價格也相對較貴。大粒徑的固定相則柱壓低,適用于一些對柱壓有要求的儀器或大規(guī)模制備色譜,但分離效果相對較差。
5.孔徑:對于一些多孔性的固定相,孔徑是一個重要參數(shù),一般以埃(?)為單位,常見的有 60?、100?、300? 等??讖酱笮∮绊懼鴺悠贩肿釉诠潭ㄏ鄡?nèi)部的擴散和傳質(zhì)過程??讖捷^大時,適用于分離大分子化合物,可避免分子在孔內(nèi)的擴散受限;孔徑較小時,對小分子化合物的分離效果較好,能提供較大的比表面積和較高的柱效。
6.柱效:是衡量色譜柱分離效能的指標,通常用理論塔板數(shù)(N)或塔板高度(H)來表示。理論塔板數(shù)越多,或塔板高度越小,說明色譜柱的柱效越高,分離能力越強。柱效與固定相的性質(zhì)、粒徑分布、填充均勻性以及流動相的性質(zhì)、流速等因素有關(guān)。