一、色譜柱的日常維護方法
流動相處理:流動相需使用高純度的試劑和超純水配制,使用前要經過 0.45μm 或更小孔徑的濾膜過濾,去除顆粒雜質,同時進行脫氣處理,防止氣泡進入色譜柱影響分離效果和損壞色譜柱。
樣品處理:樣品應盡可能溶解在與流動相組成相近的溶劑中,進樣前需經過過濾或離心處理,去除不溶性雜質,避免堵塞色譜柱。對于復雜樣品,可進行預處理,如萃取、凈化等,以減少雜質對色譜柱的污染。
流速控制:在使用新色譜柱時,應從較低的流速開始逐漸增加,直至達到最佳分離效果的流速,避免初始流速過高對色譜柱造成沖擊。同時,要確保流速穩(wěn)定,避免流速的突然變化對色譜柱填料產生破壞。
柱溫控制:根據色譜柱的使用要求和樣品的性質,選擇合適的柱溫。一般來說,柱溫應保持在色譜柱的耐受溫度范圍內,避免過高或過低的溫度對色譜柱造成損傷。同時,要避免柱溫的急劇變化,防止色譜柱填料因熱脹冷縮而損壞。
二、色譜柱的定期維護方法
沖洗色譜柱:在分析結束后,應及時用適當?shù)娜軇_洗色譜柱,以去除殘留的樣品、流動相和雜質。對于反相色譜柱,通常先用高比例的水相沖洗,再用有機溶劑沖洗;對于正相色譜柱,則先用有機溶劑沖洗,再用低極性溶劑沖洗。沖洗時間一般為 30-60 分鐘,具體時間可根據色譜柱的污染程度和使用情況進行調整。
檢查柱效:定期通過分析標準樣品或已知混合物來檢查色譜柱的柱效。如果發(fā)現(xiàn)柱效下降,可能是由于色譜柱污染、填料流失或其他原因引起的,需要及時采取相應的措施進行處理,如重新平衡色譜柱、進行柱再生或更換色譜柱。
三、色譜柱的保存方法
干燥保存:如果色譜柱需要長時間保存,應將其沖洗干凈后,用適當?shù)挠袡C溶劑(如甲醇、乙腈等)充滿色譜柱,然后密封兩端,放置在干燥、陰涼、避光的地方保存。避免將色譜柱暴露在空氣中,防止填料干燥收縮或吸收空氣中的水分和雜質。
定期活化:對于長期未使用的色譜柱,在重新使用前,應進行活化處理。一般是用流動相以較低的流速沖洗色譜柱,使其達到平衡狀態(tài)?;罨瘯r間可能需要數(shù)小時甚至更長,具體時間取決于色譜柱的類型和保存時間。