一、分光光度計(jì)的組成部分
分光光度計(jì)的型號(hào)繁多,但其基本結(jié)構(gòu)由以下幾部分組成:光源、單色器、吸收池、檢測(cè)系統(tǒng)及信號(hào)顯示系統(tǒng)。
1、光源
在吸光度的測(cè)量中,要求光源發(fā)出的所需波長(zhǎng)范圍內(nèi)的連續(xù)光譜具有足夠的光強(qiáng)度,并能在一定時(shí)間內(nèi)保持穩(wěn)定。
2、單色器
單色器是能將光源發(fā)射的連續(xù)光源分解為單色光并從中選出任一波長(zhǎng)單色光的光學(xué)系統(tǒng)。它由入射狹縫、準(zhǔn)光器、色散原件、聚焦元件和出射狹縫等幾個(gè)部分組成。
3、吸收池
吸收池又稱比色皿,用于盛裝參比溶液和待測(cè)試液。儀器一般配有液層厚度為0.5cm、1cm、2cm、3cm等的長(zhǎng)方形比色皿。
4、檢測(cè)系統(tǒng)
檢測(cè)系統(tǒng)通常通過(guò)利用光電效應(yīng)將透過(guò)吸收池的光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓽y(cè)的電信號(hào),而且所產(chǎn)生的電信號(hào)應(yīng)與照射于檢測(cè)器上的光信號(hào)成正比。可見(jiàn)分光光度計(jì)常常使用光電管或光電倍增管做檢測(cè)器。
5、信號(hào)顯示系統(tǒng)
光電轉(zhuǎn)換器產(chǎn)生的各種電信號(hào),經(jīng)放大等處理后,用一定方式顯示出來(lái),以便于計(jì)算和記錄。
二、分光光度計(jì)原理
分光光度計(jì)的原理是采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源,通過(guò)系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源,光線透過(guò)測(cè)試的樣品后,部分光線被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度,樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
三、分光光度計(jì)的種類
1、可見(jiàn)分光光度計(jì)
用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,稱為可見(jiàn)分光光度計(jì)。
2、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)
紫外可見(jiàn)光譜儀用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光或紫外光(200-760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,可以測(cè)定核酸和蛋白的濃度,也可以測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。
3、紅外分光光度計(jì)
一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機(jī)化合物最常用的光譜區(qū)域,能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣。
4、熒光分光光度計(jì)
熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器,應(yīng)用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域,通過(guò)對(duì)這些參數(shù)的測(cè)定,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。